pLIVE—IL-1β表达载体的构建及在Hepal- 6细胞的表达

来源 :潍坊医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liuxin87675241

【摘要】

：

目的构建应用于体内表达和研究的小鼠IL-1β肝癌细胞特异性表达载体，观察其在小鼠HE—PA1-6细胞中的表达水平。方法分离BALB／c小鼠外周血淋巴细胞，LPS刺激后提到总RNA，RT—PCR扩

【作者】

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王焕芹梁淑娟刘艳艳李青春肖伟玲李若葆

【机构】

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潍坊医学院免疫学教研室,潍坊医学院人体解剖学教研室

【出处】

：

潍坊医学院学报

【发表日期】

：

2008年3期

【关键词】

：

肝癌 IL-1Β pLIVETM 促炎性细胞因子 Hepatoma IL-1β pLIVETM Proinflammatory cytokine

【基金项目】

：

山东省优秀中青年科学家科研奖励基金（2004BSB14074）,山东省卫生高层次人才1020工程专项基金,教育部科学技术研究项目重点项目（205090）,山东省自然科学基金（Y2007C044）

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目的构建应用于体内表达和研究的小鼠IL-1β肝癌细胞特异性表达载体，观察其在小鼠HE—PA1-6细胞中的表达水平。方法分离BALB／c小鼠外周血淋巴细胞，LPS刺激后提到总RNA，RT—PCR扩增IL-1β基因，与pLIVETM连接构建pLIVE-IL-1β重组表达载体，并通过菌落PCR、限制性酶谱分析、DNA序列分析进行鉴定。利用TransITTM将pLIVE-IL-1B转染至Hepa1-6肝癌细胞，RT—PCR分析IL-1β的表达水平。结果从小鼠腹腔巨噬细胞中RT-PCR扩增得到一822bp的片段，纯

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