【摘 要】
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采用Piscidin基因串联表达的方案,通过Eco 31Ⅰ限制性内切酶定向连接方法合成Pseudosciaena crocea-Sciaenops ocellatus-piscidin(PSP)串联基因.以毕赤酵母(Pichia pastoris
【机 构】
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自然资源部第四海洋研究所,厦门大学海洋与地球学院,大黄鱼育种企业国家重点实验室
【基金项目】
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中央引导地方科技发展专项资金(2017L3019);大黄鱼技术平台建设项目(XDHT2018143A);国家海水鱼产业技术体系项目(CARS-47);自然资源部第四海洋研究所博士启动基金(201803);广西自然科学基金青年基金(2018JJB130206)
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采用Piscidin基因串联表达的方案,通过Eco 31Ⅰ限制性内切酶定向连接方法合成Pseudosciaena crocea-Sciaenops ocellatus-piscidin(PSP)串联基因.以毕赤酵母(Pichia pastoris)的穿梭表达载体pPICZαA构建重组表达质粒pPICZαA-PSP,转化入毕赤酵母SMD1168菌株中.应用实时荧光定量PCR方法进行多拷贝克隆筛选,实现了PSP重组串联肽的诱导表达和纯化,并对其抑菌活性进行初步鉴定,为piscidin抗菌肽的生产应用奠定基础.
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