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采用高效液相色谱法在手性冠醚柱上拆分丙氨酸、正缬氨酸和犬尿氨酸3种对映体。使用CROWN—PAKCR（＋）柱（150mm×4mm，5μm），以HClO4溶液（pH1．0）为流动相，柱温20℃，流速1．0mL／min，丙氨酸、正缬氨酸和犬尿氨酸的检测波长分别为200、220和254nm，3种氨基酸都得到手性拆分。考察了流动相流速、温度及pH对分离的影响，并通过对选择性、保留时间和柱效的考察判断影响分离度的因素。结果表明：降低温度有助于提高手性选择性，但会降低柱效，从而影响分离度。在0～20℃柱温范