HPLC-PAD-ELSD法同时测定牛黄降压丸中6个成分的含量

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目的:建立高效液相色谱-二极管阵列检测-蒸发光散射检测(HPLC-PAD-ELSD)法同时测定牛黄降压丸中芍药苷、阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芩苷、胆酸、黄芪甲苷含量的方法.方法:以L9(34)正交试验优化提取条件.采用Waters Sun-fire C18 色谱柱(250mmx4.6mm,5 μm),以乙腈-0.2%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 ml·min-1.芍药苷、阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芩苷检测波长为278 nm;胆酸、黄芪甲苷使用ELSD检测器,漂移管温度为100℃,氮气流速为3.0 L·min-1.结果:芍药苷、阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芩苷、胆酸、黄芪甲苷进样浓度分别在6.14~98.21 μg·ml-1(r=0.999 4)、10.84~173.50 μg·ml-1(r=0.999 8)、1.13~18.06μg·ml-1(r=0.999 6)、301.98~4 831.73 μg·ml-1(r=0.999 7)、3.44~55.02 μg·ml-1(r=0.999 1)、2.38~38.02 μg·ml-1(r=0.999 9)范围内与峰面积呈现良好的线性关系;平均加样回收率分别为 103.0%,100.4%,101.5%,99.0%,102.4%,101.0%,RSD 分别为0.6%,0.4%,1.0%,0.6%,0.7%,1.1%(n=9).牛黄降压丸最佳提取方法为:采用50 ml 70%乙醇30℃超声提取30 min.结论:所建立的方法准确、灵敏度高、重复性好,可用于牛黄降压丸的质量控制.
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