针对HBVx基因的siRNA重组腺病毒的制备及其对HBVx基因表达的抑制作用

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ksxy008
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目的:构建针对乙型肝炎病毒X基因(HBx基因)的小干扰RNA(siRNA)重组腺病毒表达载体,并在能表达HBx基因的人肝癌细胞株HepG2中观察其对HBx基因表达的抑制作用.方法:重组腺病毒穿梭载体pShuttle—HBx与骨架载体在大肠杆菌BJ5183中同源重组得到重组腺病毒载体,后者转染HEK293细胞,包装并扩增出病毒颗粒.用获得的病毒感染能表达HBx基因人肝癌细胞株HepG2,收集细胞总RNA和总蛋白,采用RT—PCR和Western Blot方法检测细胞中HBx基因表达的变化.结果:经限制性内切
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1临床资料我院1998-06/2006—12共收治肺中叶病变患者28(男15,女13)例;年龄12—74(平均51.5)岁.恶性肿瘤17例,良性病变11例.大于40岁者恶性肿瘤15例,小于40岁者良性病变8例.24例有咳嗽、咳