脂质体介导增强型绿色荧光蛋白基因在鼠视网膜Müller细胞中的表达

来源 :中华实验眼科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:li_uwx
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目的 研究脂质体介导增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因对体外培养的鼠视网膜Müller细胞转染的有效性及安全性.方法 采用视网膜组织块法培养鼠视网膜Müller细胞,振荡法分离纯化细胞,并对其进行免疫细胞化学鉴定.用阳离子脂质体Lipofectamine 2000负载pEGFP-N1质粒转染Müller细胞,荧光显微镜检测转染后12、24、48、72 h的转染效率.台盼蓝排斥实验检测转染和未转染细胞的活力,明确脂质体Lipofectamine 2000对Müller细胞的毒性作用.结果 成功培养视网膜Müller细胞,传代后90%以上的细胞呈神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性.Lipofectamine 2000介导质粒pEGFP-N1转染Müller细胞后12、24、48、72 h的转染效率分别为(9.7±1.9)%、(18.1±16)%、(17.2±2.5)%、(16.9±1.7)%.台盼蓝排斥实验显示Lipofectamine 2000转染前后活细胞率分别为(98.2±5.6)%、(96.1±6.2)%.结论 脂质体Lipofectamine 2000可安全有效地介导Müller细胞的转染,为进一步明确Müller细胞的病理、生理功能及靶向Mller细胞的基因治疗提供了新的手段。

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一  他在少年时代就有几项小发明。作为农场主的儿子,他很喜欢在农场生活,并打算在农场度过一生。在此期间,他喜欢上了一个女孩。女孩对他说:“我不会嫁给一个要在农场呆一辈子的庄稼汉。我想嫁的人是科学家!”  为了爱情,他离开了家乡,前往省城的学校求学。后来,他创造了多项发明,并成为了瑞典皇家科学院院士。他对灯具进行的创造性改革不但连爱迪生都大为惊叹,还获得了1912年的诺贝尔物理学奖。当然,那个女孩最