【摘 要】
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目的培养针对Wistar大鼠周围神经自身抗原髓鞘碱性蛋白Ⅱ(myelin basic proteinⅡ,P2)特异性T淋巴细胞,用于研究其在神经再生中的作用。方法从成年Wistar大鼠周围神经内提取P
【机 构】
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第三军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室,南京军区福州总医院神经内科
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目的培养针对Wistar大鼠周围神经自身抗原髓鞘碱性蛋白Ⅱ(myelin basic proteinⅡ,P2)特异性T淋巴细胞,用于研究其在神经再生中的作用。方法从成年Wistar大鼠周围神经内提取P2并配制成50%(质量浓度)匀浆,将其与完全福(氏)佐剂(CFA)按1∶1混匀后,按体重0.4mL/500g注入大鼠双后足垫内诱导实验性自身免疫性神经炎(EAN)模型。从EAN发病大鼠腹股沟淋巴结内分离T淋巴细胞,经4个循环的P2刺激后利用3H-TdR掺入法测定其对P2刺激的反应,采用流式细胞仪鉴定其表型,Western blot法检测其表达神经营养因子(NGF)水平。结果从大鼠周围神经内分离出一相对分子质量约为15000、等电点(PI)为9.5的蛋白,其相对分子质量和PI与文献一致,该蛋白即为P2。利用P2与CFA可诱导Wistar大鼠EAN动物模型,分离的T淋巴细胞对P2抗原呈特异性增殖,(95.72±0.85)%的细胞为CD4+T淋巴细胞,其NGF水平明显高于对照组(P<0.05)。结论利用提取的P2可诱导EAN并建立特异性T淋巴细胞,该T淋巴细胞具有较强的NGF表达能力,适用于神经再生研究。
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