论文部分内容阅读
[摘要] 目的 探讨呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）在鼻息肉组织中的表达及其与鼻息肉发病的相关性。 方法 利用免疫组织化学方法检测40例鼻息肉患者组织中RSV、ADV的表达情况，另检测20例鼻中隔偏曲患者正常的鼻黏膜组织中RSV、ADV表达情况。结果 正常鼻黏膜中的RSV、ADV表达的阳性率分别为35.0%、35.0%；鼻息肉组织中RSV的阳性表达率为67.5%，ADV的阳性表达率为75.0%。结论 RSV、ADV感染与鼻息肉的发病密切相关。
[关键词] 鼻息肉；呼吸道合胞病毒；腺病毒；免疫组织化学
[中图分类号] R725.6 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2014）10-17-03
[Abstract] Objective To investigate the expression of RespiratorySyncytialVirus（RSV）， Adenovirus（ADV）in nasal polyps tissue，andtheir relevance to the pathog enesis of human nasal polyps. Methods Immunohistochemistry was used to detect the expression ofRespiratorySyncytialVirus（RSV），Adenovirus（ADV），in excisiona l nasal polyps t issue from 40 patients with nasal polyps. In addition，the ex pression of RSV，ADV were also detected in normal nasal mucosa from 20 patients with the nasal septum deviation. Results In the normal nasal mucosa，the positive rates of RSV，ADVexpression were 35.0%，35.0% respectively.In the nasal polyps tissues，RSV positive rate was 67.5%，ADV positive rate was 75.0%. Conclusion RSV and ADV infectionpostive expression suggest that they closely correlate with the pathogenesis ofhuman nasal polyps.
[Key words] Nasal polyps；RSV；ADV；Immunohistochemical analysis
鼻息肉是鼻科常见疾病，发病率较高，但尚无明确作用机制。病理特点为黏膜间质水肿，腺体扩张、数量减少，血管扩张，伴有炎性细胞增多。本研究应用免疫组织化学检测鼻息肉组织及正常鼻黏膜组织中的RSV、ADV的表达，以了解RSV、ADV与鼻息肉发病的相关性。
1 资料与方法
1.1 一般资料
鼻息肉标本40例，来自2012年7月～2013年7月我院住院鼻息肉患者手术标本。所有患者3个月内未使用任何激素类药物。所有鼻息肉患者均已经经过CT、鼻内窥镜的确认，所有鼻息肉组织均已经病理确认。3 讨论
鼻息肉是耳鼻咽喉科的常见病，其发病机制一直没有统一的认识，研究表明鼻息肉的发病与自主神经失调、代谢紊乱、血管运动功能失调、离子通透改变、气流动力、感和变态反应有关。病毒感染可能作为最初的触发因素引起鼻腔外侧壁的炎症进而发展成为鼻息肉[1]。本次研究发现，与正常的鼻黏膜相比，RSV、ADV感染抗体表达明显增高，提示这些因素可能参与了鼻息肉的形成和发展。
呼吸道合胞病毒（respiratory syncytil virus，RSV）属副黏病病毒科，肺炎病毒属，病毒颗粒直径150～300nm。主要编码11个蛋白质，其中F蛋白和G蛋白是两个主要的结构蛋白[15]，可能诱导机体产生抗体和细胞免疫[1]。RSV是引起支气管肺炎、哮喘以及严重下呼吸道疾病的致病原因之一。RSV在引起呼吸道疾病中，NF-κB通道是起了重要的作用。众所周知，RSV影响着NF-κB各种基因的表达[2]。它们在局部微环境的炎症反应中起着十分重要作用[3]。近年来，上下呼吸道是一个气道，一个炎症已形成共识，同时上下呼吸道炎症也相互影响，变异性鼻炎和哮喘的发病机理相同，在呼吸道变应性炎症反应中，有一系列的炎症细胞，黏附因子，趋化因子以转录调节因子参与了炎症反应[4]。RSV在气道黏膜上复制，可以通过简单的上呼吸道感染传播远端下呼吸道，引起严重的下呼吸道感染。感染RSV的住院患儿在外周血单核细胞表达TH1细胞因子IL-2、IFN-γ、TH2细胞因子IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13较非感染RSV的住院患兒明显增高[5]，而IL、IFN对鼻息肉的产生和发展有着重要和不可逆转的作用[6]。本实验中，我们发现，RSV在鼻息肉组织中上皮细胞和腺体上皮细胞的阳性表达明显高于正常的鼻黏膜组织。
腺病毒（adenovirus，ADV）是被罗氏及其同事于1953年分离人体腺样体发生自发性退化的组织培养中发现的，目前公认的有49中血清型，分A、B、C、D、E、F及G七个组[10-12]，大约有一半与人类疾病密切相关[9]。腺病毒为双链线性DNA病毒，基因组长约36kb，核心为衣壳，无包膜，形态呈对称二十面体。衣壳主要有240个六邻体和12个五邻体及与后者相垂直连接的纤毛组成[7]。儿童急性呼吸道疾病中约有5%是ADV感染引发的[13]，可以引起一系列急性呼吸道疾病，如咽喉炎、支气管炎、肺炎等，严重者可导致死亡[14]。机体在感染ADV后可激活以炎症反应为主的固有免疫。一方面炎症反应能帮助清除病毒及控制感染，而另一方面过度暴发的炎症反应能造成自身组织细胞的损伤。后者是感染ADV后导致机体受损的主要原因[8]。在本实验中，我们发现，ADV在鼻息肉组织中上皮细胞的表达和腺体上皮细胞的表达明显高于正常鼻黏膜。 综上所述，本实验中运用免疫组织化学的技术在细胞学水平上分别对呼吸道合胞病毒和腺病毒进行了定性研究分析。结果显示，呼吸道合胞病毒和腺病毒在鼻息肉组织中阳性表达明显高于正常鼻黏膜，差异有统计学意义（P<0.05）。说明呼吸道合胞病毒和腺病毒在鼻息肉组织中抗原分布高于正常鼻黏膜组织，进一步说明两种病毒在诱导和产生鼻息肉组织的过程中具有一定的相关性。从而为鼻息肉靶向治疗提供新的用药指导，为预防鼻息肉的复发提供新的理论依据。同时我们发现在呼吸道合胞病毒高表达的组织中，腺病毒病毒同样高表达，腺病毒与呼吸道合胞病毒在鼻息肉组织中是否具有相关性，这一问题我们在进一步的研究之中。
[参考文献]
[1] Wood AJ，Antoszewska H，Fraser J，et al. Is chronic rhinosinusitis caused by persistent respiratory virus infection？[J].J int Forum Allergy，2011，1（2）：95-100.
[2] Choudhary S，Boldogy S，Garofalo R，et al.Respiratory syncytial virus inluences NF-κB-dependent gene expression through a novel pathway involving MAP3K14/NIK expression and nuclear complex formation with WF-kB2[J].J Virol，2005，79（14）：8948-8959.
[3] 朱俊，沙泉.核因子κB与鼻息肉[J].国际耳鼻咽喉头颈外科学杂志，2006，30（5）：313-316.
[4] Collins PL，Chanock RM，Murphy BR.Respiratory syncytial viruses，In：Knipe DM，Hawley PM，eds.Fields virology[M]. 4thed.Vol.philade/phia：Lippincott-Raren，2001：1443-1485.
[5] RalphA Tripp，Deborah Moore，Albert Barskey IV，et al.Peripheral Blood Mononuclear cells from Infants Hospitalized Because of respiratory Syncytial Virus Infection Express T Helper-1 and T Helper-2 Cytokines and CC chemokine messenger RNA [J].J Infect Dis，2002，185（15）：1388-1394.
[6] 岳丽艳，郑永波，赵军.鼻息肉发病机制研究进展[J].国际耳鼻咽喉头颈外科学杂志，2012，36（3）：157-162.
[7] Ebner K，Rauch M，Preuner S，et al.Typing of human adenoviruses in specimens from immunosuppressed patients by PCR-fragment length analysis and real-time quantitative PCR[J].J Journal of Clinical Microbiology，2006，44（8）：2808-2815.
[8] 张梦雯，倪淑媛，李煜生.腺病毒5型和7型感染诱导呼吸道上皮细胞黏膜蛋白1表达的差异性研究[J].中华微生物学和免疫学杂志，2012，32（2）：172-177.
[9] Schnurr D，Dondero ME.Two new candidate adenovirus serotypes[J].Intervirology，1993，36：79-83.
[10] Jones MS，Harrach B，Ganac RD，et al.New adenovirus species found in a patient presenting with gastroenteritis[J]. Journal of Virology，2007，81：5978-5984.
[11] Robinson CM，Singh G，Henquell C，et al.Computational analysis and identification of an emergent human adenovirus pathogen implicated in a respiratory fatality[J].Virology，2010，492：141-147.
[12] Walsh MP，Seto J，Liu EB，et al.Computational analysis of two species C human adenoviruses provides evidence of a novel virus[J].Journal of Clinical Microbiology，2011，49（10）：3489-3490.
[13] 朱汝南 ，鄧洁，王芳，等.2000年秋冬至2002年夏北京地区急性呼吸道感染病毒病原学研究[J].临床儿科杂志，2003（1）：25-28.
[14] Guadalupe Carballal，Cristina M.Videla，M. AlejandraEspinosa，et al. Multicentered study of viral acute lower respiratory infections in children from four cities of Argentina，1993-1994[J].J Med Rirol，2001，64（2）：167-174.
[15] Gower TL，Peeples ME，Collins PL，et al.RhoA is activated during respiratory syncytial virus infection [J].Virology，2001，283（2）：188-196.
（收稿日期：2014-03-13）
[关键词] 鼻息肉；呼吸道合胞病毒；腺病毒；免疫组织化学
[中图分类号] R725.6 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2014）10-17-03
[Abstract] Objective To investigate the expression of RespiratorySyncytialVirus（RSV）， Adenovirus（ADV）in nasal polyps tissue，andtheir relevance to the pathog enesis of human nasal polyps. Methods Immunohistochemistry was used to detect the expression ofRespiratorySyncytialVirus（RSV），Adenovirus（ADV），in excisiona l nasal polyps t issue from 40 patients with nasal polyps. In addition，the ex pression of RSV，ADV were also detected in normal nasal mucosa from 20 patients with the nasal septum deviation. Results In the normal nasal mucosa，the positive rates of RSV，ADVexpression were 35.0%，35.0% respectively.In the nasal polyps tissues，RSV positive rate was 67.5%，ADV positive rate was 75.0%. Conclusion RSV and ADV infectionpostive expression suggest that they closely correlate with the pathogenesis ofhuman nasal polyps.
[Key words] Nasal polyps；RSV；ADV；Immunohistochemical analysis
鼻息肉是鼻科常见疾病，发病率较高，但尚无明确作用机制。病理特点为黏膜间质水肿，腺体扩张、数量减少，血管扩张，伴有炎性细胞增多。本研究应用免疫组织化学检测鼻息肉组织及正常鼻黏膜组织中的RSV、ADV的表达，以了解RSV、ADV与鼻息肉发病的相关性。
1 资料与方法
1.1 一般资料
鼻息肉标本40例，来自2012年7月～2013年7月我院住院鼻息肉患者手术标本。所有患者3个月内未使用任何激素类药物。所有鼻息肉患者均已经经过CT、鼻内窥镜的确认，所有鼻息肉组织均已经病理确认。3 讨论
鼻息肉是耳鼻咽喉科的常见病，其发病机制一直没有统一的认识，研究表明鼻息肉的发病与自主神经失调、代谢紊乱、血管运动功能失调、离子通透改变、气流动力、感和变态反应有关。病毒感染可能作为最初的触发因素引起鼻腔外侧壁的炎症进而发展成为鼻息肉[1]。本次研究发现，与正常的鼻黏膜相比，RSV、ADV感染抗体表达明显增高，提示这些因素可能参与了鼻息肉的形成和发展。
呼吸道合胞病毒（respiratory syncytil virus，RSV）属副黏病病毒科，肺炎病毒属，病毒颗粒直径150～300nm。主要编码11个蛋白质，其中F蛋白和G蛋白是两个主要的结构蛋白[15]，可能诱导机体产生抗体和细胞免疫[1]。RSV是引起支气管肺炎、哮喘以及严重下呼吸道疾病的致病原因之一。RSV在引起呼吸道疾病中，NF-κB通道是起了重要的作用。众所周知，RSV影响着NF-κB各种基因的表达[2]。它们在局部微环境的炎症反应中起着十分重要作用[3]。近年来，上下呼吸道是一个气道，一个炎症已形成共识，同时上下呼吸道炎症也相互影响，变异性鼻炎和哮喘的发病机理相同，在呼吸道变应性炎症反应中，有一系列的炎症细胞，黏附因子，趋化因子以转录调节因子参与了炎症反应[4]。RSV在气道黏膜上复制，可以通过简单的上呼吸道感染传播远端下呼吸道，引起严重的下呼吸道感染。感染RSV的住院患儿在外周血单核细胞表达TH1细胞因子IL-2、IFN-γ、TH2细胞因子IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13较非感染RSV的住院患兒明显增高[5]，而IL、IFN对鼻息肉的产生和发展有着重要和不可逆转的作用[6]。本实验中，我们发现，RSV在鼻息肉组织中上皮细胞和腺体上皮细胞的阳性表达明显高于正常的鼻黏膜组织。
腺病毒（adenovirus，ADV）是被罗氏及其同事于1953年分离人体腺样体发生自发性退化的组织培养中发现的，目前公认的有49中血清型，分A、B、C、D、E、F及G七个组[10-12]，大约有一半与人类疾病密切相关[9]。腺病毒为双链线性DNA病毒，基因组长约36kb，核心为衣壳，无包膜，形态呈对称二十面体。衣壳主要有240个六邻体和12个五邻体及与后者相垂直连接的纤毛组成[7]。儿童急性呼吸道疾病中约有5%是ADV感染引发的[13]，可以引起一系列急性呼吸道疾病，如咽喉炎、支气管炎、肺炎等，严重者可导致死亡[14]。机体在感染ADV后可激活以炎症反应为主的固有免疫。一方面炎症反应能帮助清除病毒及控制感染，而另一方面过度暴发的炎症反应能造成自身组织细胞的损伤。后者是感染ADV后导致机体受损的主要原因[8]。在本实验中，我们发现，ADV在鼻息肉组织中上皮细胞的表达和腺体上皮细胞的表达明显高于正常鼻黏膜。 综上所述，本实验中运用免疫组织化学的技术在细胞学水平上分别对呼吸道合胞病毒和腺病毒进行了定性研究分析。结果显示，呼吸道合胞病毒和腺病毒在鼻息肉组织中阳性表达明显高于正常鼻黏膜，差异有统计学意义（P<0.05）。说明呼吸道合胞病毒和腺病毒在鼻息肉组织中抗原分布高于正常鼻黏膜组织，进一步说明两种病毒在诱导和产生鼻息肉组织的过程中具有一定的相关性。从而为鼻息肉靶向治疗提供新的用药指导，为预防鼻息肉的复发提供新的理论依据。同时我们发现在呼吸道合胞病毒高表达的组织中，腺病毒病毒同样高表达，腺病毒与呼吸道合胞病毒在鼻息肉组织中是否具有相关性，这一问题我们在进一步的研究之中。
[参考文献]
[1] Wood AJ，Antoszewska H，Fraser J，et al. Is chronic rhinosinusitis caused by persistent respiratory virus infection？[J].J int Forum Allergy，2011，1（2）：95-100.
[2] Choudhary S，Boldogy S，Garofalo R，et al.Respiratory syncytial virus inluences NF-κB-dependent gene expression through a novel pathway involving MAP3K14/NIK expression and nuclear complex formation with WF-kB2[J].J Virol，2005，79（14）：8948-8959.
[3] 朱俊，沙泉.核因子κB与鼻息肉[J].国际耳鼻咽喉头颈外科学杂志，2006，30（5）：313-316.
[4] Collins PL，Chanock RM，Murphy BR.Respiratory syncytial viruses，In：Knipe DM，Hawley PM，eds.Fields virology[M]. 4thed.Vol.philade/phia：Lippincott-Raren，2001：1443-1485.
[5] RalphA Tripp，Deborah Moore，Albert Barskey IV，et al.Peripheral Blood Mononuclear cells from Infants Hospitalized Because of respiratory Syncytial Virus Infection Express T Helper-1 and T Helper-2 Cytokines and CC chemokine messenger RNA [J].J Infect Dis，2002，185（15）：1388-1394.
[6] 岳丽艳，郑永波，赵军.鼻息肉发病机制研究进展[J].国际耳鼻咽喉头颈外科学杂志，2012，36（3）：157-162.
[7] Ebner K，Rauch M，Preuner S，et al.Typing of human adenoviruses in specimens from immunosuppressed patients by PCR-fragment length analysis and real-time quantitative PCR[J].J Journal of Clinical Microbiology，2006，44（8）：2808-2815.
[8] 张梦雯，倪淑媛，李煜生.腺病毒5型和7型感染诱导呼吸道上皮细胞黏膜蛋白1表达的差异性研究[J].中华微生物学和免疫学杂志，2012，32（2）：172-177.
[9] Schnurr D，Dondero ME.Two new candidate adenovirus serotypes[J].Intervirology，1993，36：79-83.
[10] Jones MS，Harrach B，Ganac RD，et al.New adenovirus species found in a patient presenting with gastroenteritis[J]. Journal of Virology，2007，81：5978-5984.
[11] Robinson CM，Singh G，Henquell C，et al.Computational analysis and identification of an emergent human adenovirus pathogen implicated in a respiratory fatality[J].Virology，2010，492：141-147.
[12] Walsh MP，Seto J，Liu EB，et al.Computational analysis of two species C human adenoviruses provides evidence of a novel virus[J].Journal of Clinical Microbiology，2011，49（10）：3489-3490.
[13] 朱汝南 ，鄧洁，王芳，等.2000年秋冬至2002年夏北京地区急性呼吸道感染病毒病原学研究[J].临床儿科杂志，2003（1）：25-28.
[14] Guadalupe Carballal，Cristina M.Videla，M. AlejandraEspinosa，et al. Multicentered study of viral acute lower respiratory infections in children from four cities of Argentina，1993-1994[J].J Med Rirol，2001，64（2）：167-174.
[15] Gower TL，Peeples ME，Collins PL，et al.RhoA is activated during respiratory syncytial virus infection [J].Virology，2001，283（2）：188-196.
（收稿日期：2014-03-13）