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本研究以EcoRV和EcoR I双酶切pGEM-T-hsp65和pET-32a（＋），并将纯化的hsp65基因亚克隆至pET-32a（＋）中，构建出原核表达载体pET-hsp65。将pET-hsp65转化至感受态E．coli BL21（DE3）中，经IPTG诱导和SDS-PAGE分析，可见一条约76ku的外源蛋白带。Western blot分析表明，该蛋白具有与副结核分枝杆菌多克隆抗体发生反应的特性，为进一步研究有关hsp65的新型疫苗奠定了基础。