PRRSV ORF5基因和CSFVE2基因重组真核表达质粒的构建及小鼠免疫试验

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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)已知序列设计3对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSVORF5基因和CSFVE2基因,目的基因依次插入真核表达载体pcDNA4.0,经PCR、酶切及测序分析,重组质粒构建成功,并命名为pcDNA4.0-ORF5-E2。重组质粒回收提纯后,以100μg/只剂量免疫小鼠,免疫3次。三免后10d采血并制备血清,用间接ELISA检测小鼠血清中PRRSV及CSFV抗体效价。结果显示,所构建的重组质粒能够诱导小鼠产生PRRSV及CSFV抗体。
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