论文部分内容阅读
目的:观察不同浓度的鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠椎间盘终板软骨细胞的影响,分析其对终板软骨细胞保护的作用机制。方法:选取1月龄的健康SD大鼠,并对其椎间盘终板软骨细胞进行分离与培养,诱导组单加入10μg/L的IL-1β,药物处理组分3组,分别在培养基中加入10μg/L的IL-1β和10μg/mL、30μg/mL、50μg/mL的鹿茸多肽,MTT比色法检测3个时间节点(24h、48h、72h)各组椎间盘终板软骨细胞的增殖情况;流式细胞仪检测大鼠椎间盘终板软骨细胞的凋亡;qPCR法检测Collagen II、Collagen X、caspase-3、MMP-13、Bax、Bcl-2基因的表达水平。结果:在24h、48h、72h时间点,MTT法检测10μg/mL鹿茸多肽组在各时间点终板软骨细胞增殖情况与IL-1β诱导组比较,差异不具有统计学意义(P>0.05);而30μg/mL组和50μg/mL组均能拮抗IL-1β对软骨终板细胞増殖的抑制作用,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);流式分析结果表明,不同浓度的鹿茸多肽均能够降低IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的凋亡比例(P<0.05,P<0.01);qPCR检测结果表明,IL-1β诱导组的Cllagen II、Bcl-2基因的表达减弱,Collagen X、caspase-3、Bax、MMP-13基因的表达增强,与空白对照组对比差异具有统计学意义(P<0.05);各浓度鹿茸多肽组均能够上调Cllagen II、Bcl-2基因的表达(P<0.05,P<0.01),下调Collagen X、caspase-3、Bax、MMP-13基因的表达(P<0.05,P<0.01),以50μg/mL组效果最为显著(P<0.01)。结论:一定浓度的鹿茸多肽通过抑制软骨终板细胞的凋亡,促进其増殖,调控其相关基质蛋白及基质降解酶、凋亡因子等基因的表达,起到了对退变的椎间盘终板软骨细胞的保护作用。