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目的:利用pEGFP6-1和pGenesil-1质粒构建针对Fas的2个短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)串联表达的载体。方法:设计表达2个shRNA结构的互补DNA序列,经退火成双链,分别克隆至带有U6启动子的质粒载体pEGFP6.1和pGenesil-1中,构建重组质粒,转化大肠杆菌DH5α菌株,扩增,提取质粒,酶切鉴定后测序分析.分别用SacI+Sa/I双酶切重组质粒,胶回收酶切pEGFP6-1-siFas1大片段和酶切pGenesil-1-siFas2小片段,T4 DN