【摘 要】
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目的研究喉癌Hep-2细胞株中CD133+肿瘤细胞的干细胞特性及其生物学特性.方法流式细胞仪分选Hep-2细胞株中CD133+肿瘤细胞,Transwell法检测CD133+肿瘤细胞侵袭能力及三代克隆形成能力;CD133+肿瘤细胞与紫杉醇共培养,10 Gy的直线加速器照射CD133+肿瘤细胞,四甲基偶氮唑蓝法计算其相对存活率和生长抑制率,观察其放化疗抵抗性.结果CD133+细胞比例为3.1%±0.2
【机 构】
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甘肃省人民医院耳鼻咽喉头颈外科,兰州730000,甘肃省人民医院耳鼻咽喉头颈外科,兰州730000,甘肃省人民医院耳鼻咽喉头颈外科,兰州730000,兰州大学基础医学院病理生理学研究所,甘肃省人民医院
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目的研究喉癌Hep-2细胞株中CD133+肿瘤细胞的干细胞特性及其生物学特性.
方法流式细胞仪分选Hep-2细胞株中CD133+肿瘤细胞,Transwell法检测CD133+肿瘤细胞侵袭能力及三代克隆形成能力;CD133+肿瘤细胞与紫杉醇共培养,10 Gy的直线加速器照射CD133+肿瘤细胞,四甲基偶氮唑蓝法计算其相对存活率和生长抑制率,观察其放化疗抵抗性.
结果CD133+细胞比例为3.1%±0.2%,流式细胞仪分选纯度可达90.2%±5.5%,分选后的CD133+细胞贴壁,呈团块状、克隆球状生长.增殖速度明显较CD133-细胞快;Transwell实验中,相同视野CD133+细胞穿膜细胞数(526±39)个/每视野,而CD133-细胞为(220±20)个/每视野,二者差异有统计学意义(t=22.08,P<0.01);CD133+细胞三代克隆形成率分别为30.0%±4.7%、32.2%±3.6%、32.7%±3.4%,CD133-细胞三代克隆形成率分别为15.2%±2.2%、12.0%±2.5%、13.8%±3.3%,同代比较差异有统计学意义(t值分别为8.99、14.66、12.69,P值均<0.01).在紫杉醇共培养体系中,CD133+细胞24 h、48 h、72 h的相对存活率分别为90.1%±5.9%、85.1%±7.1%、70.3%±6.4%,均高于同时期对照组CD133-细胞(t值分别为5.24、8.18、8.14,P值均<0.01);放射线照射后,CD133+细胞生长抑制率30.0%±7.1%,显著低于CD133-细胞的55.0%±6.3%(t=8.30,P<0.01).
结论CD133+Hep-2细胞所占比例较小,具有强的增殖、侵袭能力及克隆形成能力,对放化疗有抵抗性,具有干细胞特性.靶向CD133+肿瘤细胞,有望有效杀伤喉癌干细胞.
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