【摘 要】
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构建了一个含酿酒酵母PRO3基因的分泌型表达载体pCBy310,在pCBy310上插入ρHCG(人绒毛膜促性腺激素ρ亚基)-cDNA以形成一个重组质粒pCBy314.利用酿酒酵母脯氨酸合成酶基因缺
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构建了一个含酿酒酵母PRO3基因的分泌型表达载体pCBy310,在pCBy310上插入ρHCG(人绒毛膜促性腺激素ρ亚基)-cDNA以形成一个重组质粒pCBy314.利用酿酒酵母脯氨酸合成酶基因缺陷株的独特属性,即它们不能在丰富培基中生长,pCBy314在酿酒酵母Pro3-缺陷株(MB299-A)的转化子可以在丰富培基中生长,而且保持有丝分裂稳定性.在优化条件(但尚非最佳条件)下,ρHCG在培液中的产量是650g/L.说明YPD可以用为选择培基,而且酿酒酵母在YPD中比在选择培基中生长更旺盛,可以提高表达产物的产量,加之YPD的成分简单又便宜.因此得出结论,PRO基因可以广泛地用于构建在酿酒酵母中克隆和表达外源基因的载体,以便用丰富培基作为选择压力直接筛选.
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