【摘 要】
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以cfb基因保守序列的6个区域设计4条特异性引物,利用链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)在恒温(65℃)下保温40 min,建立了无乳链球菌Streptococcus agalactiae的LAMP技术。
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以cfb基因保守序列的6个区域设计4条特异性引物,利用链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)在恒温(65℃)下保温40 min,建立了无乳链球菌Streptococcus agalactiae的LAMP技术。建立的LAMP方法能够特异性地检测无乳链球菌,检测灵敏度为3.7×101~3.7×102cfu/m L,反应前加入显色剂钙黄绿素避免二次污染。现场应用中采用FTA卡采集红尾皇冠鱼Aequidens rivulatus病鱼肝脏组织病原菌,操作简便、快捷。研究表明,针对无乳链球菌cfb基因建立的LAMP检测方法具有较高的特异性及稳定性,尤其是具有快速、简便、成本低等优点,可用于无乳链球菌的野外现场快速检测。
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