论文部分内容阅读
利用Trizol法提取接种PRSV 4d的番木瓜种苗总RNA，分离纯化mRNA，反转录合成双链cDNA，双链cDNA末端经Pfu—DNA聚合酶补平，与EcoR I接头连接，Xho I酶切消化产生粘端。用Sepharose CL-2B柱分离纯化去除小分子cDNA片段，再与pMyr酵母表达载体连接，转化受体菌XL10-Gold，构建了接种PRSV番木瓜种苗胞质酵母双杂交cDNA文库。所获得的原始文库的克隆总数为1．8×10^6cfu，重组率为100％，文库滴度为2．6×10^9cfu／mL