人环氧合酶—2(hCOX—2)编码基因的克隆及其反义核酸转染胃癌细胞的初步研究

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环氧合酶-2与肿瘤发生的关系已成为肿瘤研究的新热点之一。本研究旨在获得hCOX-2编码基因序列,构建其正、反义真核表达载体,并用反义重组载体转染COX-2高表达的胃癌细胞,以进一步研究其生物学作用及其在肿瘤发生中的作用机制。方法 按文献报道的hCOX-2核苷酸序列设计合成PCR引物,利用总RNA抽取试剂盒从COX-2高表达的培养的人胃癌细胞系SGC7901中提取细胞总RNA,反转录合成cDNA,再用PCR方法扩增目的基因序列。PCR产物经DNA序列测定证实后,利用引物5端引入的EcoRⅠ,XbaⅠ酶切位
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