【摘 要】
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为构建Asial型口蹄疫病毒Asial/YS/CHA/05株的感染性克隆,根据该毒株的全基因组序列,将其分为6段进行RT-PCR扩增,并拼接克隆至pBluescriptⅡSK(+)载体中,构建了全长基因组的e
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室
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为构建Asial型口蹄疫病毒Asial/YS/CHA/05株的感染性克隆,根据该毒株的全基因组序列,将其分为6段进行RT-PCR扩增,并拼接克隆至pBluescriptⅡSK(+)载体中,构建了全长基因组的eDNA克隆pAsi.用Not Ⅰ将质粒线性化后体外转录并转染BHK-21细胞,转染细胞中出现明显的细胞病变.RT-PCR结合序列分析表明,拯救病毒中作为人工设计的分子标记PstⅠ酶切位点被消除,因此,排除了亲本病毒污染的可能.该感染性克隆的构建,为深入探讨Asial型口蹄疫病毒的致病机理以及新型疫苗的研制奠定了基础.
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