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目的：制备抗甲状腺素抗体Ｆａｂ’片段，并达到符合酶标记的要求，以期可用于夹心酶联免疫方法（ＥＬＩＳＡ）测定血清中游离甲状腺素的浓度。方法：用硫酸钠ＤＥＡＥ纤维素层析法从兔抗Ｔ４的抗血清中提纯相应的ＩｇＧ，用胃蛋白酶将ＩｇＧ消化为Ｆ（ａｂ’）２片段，后者再用巯基乙醇还原为Ｆａｂ’。结果：用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）鉴定纯化的ＩｇＧ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’均为单一条带，分子量分别为１５ＫＤ、９７ＫＤ、４９ＫＤ；纯化后得到的ＩｇＧ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’的回收率分别为６２．２％、６７．０％、７１．２％；用放免法检测均具有免疫活性；Ｆａｂ’每分子中的巯基数为１．０６。结论：用本文方法制备的Ｆａｂ’片段经鉴定，合乎酶标记和酶免工作的要求。