论文部分内容阅读
目的 克隆人脂联素（hAPM）基因及构建真核表达重组体PGEX-4T-1／hAPM cDNA，诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶-hAPM（GST—hAPM）融合蛋白。方法 应用RT—PCR法从中国汉族人大网膜脂肪垫总RNA中扩增出APM cDNA全长基因，并在基因上下游分别克隆上EeoRl、Sail两个酶切位点，将其定向导入PGEX-4T-1多克隆位点，构建PGEX-4T-1／hAPM融合表达载体，转化大肠杆菌BL21（DE3）后进行诱导表达。结果 从脂肪组织总RNA中扩增得到760bp片段APM基因，经双酶切