【摘 要】
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目的利用CRISPR/Cas9技术敲除SiHa细胞中的卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)基因,构建FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株。方法构建sgRNA-FSTL1重组质粒并包装成慢病毒。收集病毒液并感染
【机 构】
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武汉大学人民医院妇科,广西壮族自治区人民医院妇科
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目的利用CRISPR/Cas9技术敲除SiHa细胞中的卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)基因,构建FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株。方法构建sgRNA-FSTL1重组质粒并包装成慢病毒。收集病毒液并感染SiHa细胞,使用嘌呤霉素筛选FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株;采用RT-qPCR和Westernblot检测SiHa细胞稳定株FSTL1mRNA和蛋白的表达情况。结果FSTL1-sgRNA慢病毒构建成功并筛选出FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株;FSTL1的mRNA和蛋白表达水平在SiHa细胞
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