【摘 要】
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目的 提取人肝癌细胞系HLE细胞表面抗原多肽并进行初步鉴定.方法应用弱酸洗涤法从HLE细胞表面洗脱出与MHC-I类分子结合的抗原多肽,经低温冷冻干燥浓缩、反相高效液相色谱仪(RP-HPLC)纯化后,用Lowry法进行定量并以基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)对其成分进行初步鉴定.结果应用弱酸洗涤法可从每109个HLE细胞表面提取抗原多肽(52.3±8.6)μg,经HP
【机 构】
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北京大学人民医院肝胆外科中心,北京大学人民医院肝胆外科中心,北京大学化学与分子工程学院,北京大学人民医院肝胆外科中心
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目的 提取人肝癌细胞系HLE细胞表面抗原多肽并进行初步鉴定.方法应用弱酸洗涤法从HLE细胞表面洗脱出与MHC-I类分子结合的抗原多肽,经低温冷冻干燥浓缩、反相高效液相色谱仪(RP-HPLC)纯化后,用Lowry法进行定量并以基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)对其成分进行初步鉴定.结果应用弱酸洗涤法可从每109个HLE细胞表面提取抗原多肽(52.3±8.6)μg,经HPLC及MALDI-TOF-MS鉴定其中有31种多肽组分.结论使用弱酸洗涤法、低温冷冻干燥以及HPLC方法可以从肝癌细胞表面洗脱并纯化出多种与MHC-I类分子结合的抗原多肽。
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