目的 建立人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel,探讨其多药耐药基因三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 (ABCG2)、三磷酸腺苷结合转运蛋白B1(ABCB1)、多药耐药相关蛋白1(ABCC1)、谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)、二氢叶酸还原酶(DHFR)、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)和β-微管蛋白Ⅲ(TUBB3)的表达及意义.方法 采用多西他赛中等浓度、间歇作用法建立耐药细胞株BT549/Docetaxel,采用噻唑蓝(MTT)法测定其对Docetaxel的耐药指数,细胞克隆形成法测定BT549/Docetaxel对多西他赛的敏感性；高效液相色谱测定细胞内多西他赛的浓度；逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定人乳腺癌多药耐药细胞BT549/Docetaxel中ABCG2、ABCB1、ABCC1、GST-π、DHFR、TopoⅡ和TUBB3的基因表达.结果 人乳腺癌耐药细胞株BT549/Docetaxel的耐药指数为18.3,冻存对耐药性无明显影响,撤药培养可使耐药性降低.BT549/Docetaxel对顺铂、5-氟尿嘧啶、环磷酰胺等抗癌药物有一定程度的耐药性.BT549/Docetaxel对多西他赛的敏感性降低,其多西他赛的含量较BT549下降,BT549/Docetaxel细胞中ABCG2、ABCB1、ABCC1、GST-π和TUBB3的基因表达水平分别为0.97±0.15、0.75±0.13、0.77 ±0.14、1.49±0.31、1.52±0.22,高于BT549细胞的基因表达水平(0.45±0.19、0.37±0.12、0.33±0.11、0.76±0.33、0.33±0.21),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 成功建立稳定的人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel,其耐药机制可能与ABCG2、ABCB1、ABCC1、GST-π、MRP和TUBB3基因的高表达有关。
人乳腺癌多西他赛耐药细胞株相关耐药基因的筛选
【摘 要】
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目的 建立人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel,探讨其多药耐药基因三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 (ABCG2)、三磷酸腺苷结合转运蛋白B1(ABCB1)、多药耐药相关蛋白1(ABCC1)、谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)、二氢叶酸还原酶(DHFR)、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)和β-微管蛋白Ⅲ(TUBB3)的表达及意义.方法 采用多西他赛中等浓度、间歇作用法建立耐药细胞
【机 构】
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450003郑州大学人民医院(河南省人民医院)乳腺外科,450003郑州大学人民医院(河南省人民医院)乳腺外科,450003郑州大学人民医院(河南省人民医院)乳腺外科,450003郑州大学人民医院(河
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2014年31期
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