【摘 要】
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目的 探讨WNT2b高表达成纤维细胞破坏肠黏膜，促进炎症性肠病（IBD）进展的机制。方法 通过体外细胞共培养及条件培养，构建成纤维细胞对Caco-2细胞的作用模型。实验组为加入20%成纤维细胞条件培养基或与WNT2b高表达成纤维细胞共培养，对照组为不含条件培养基或与野生型成纤维细胞共培养，通过跨膜电阻和荧光黄渗透率测定，评估Caco-2细胞屏障通透性的变化。与WNT2b高表达或对照肠道成纤维细胞共
【基金项目】
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国家自然科学基金（82073174）;国家自然科学基金青年项目（81802339）； 广州市医学重点学科（011006003）～～；
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目的 探讨WNT2b高表达成纤维细胞破坏肠黏膜，促进炎症性肠病（IBD）进展的机制。方法 通过体外细胞共培养及条件培养，构建成纤维细胞对Caco-2细胞的作用模型。实验组为加入20%成纤维细胞条件培养基或与WNT2b高表达成纤维细胞共培养，对照组为不含条件培养基或与野生型成纤维细胞共培养，通过跨膜电阻和荧光黄渗透率测定，评估Caco-2细胞屏障通透性的变化。与WNT2b高表达或对照肠道成纤维细胞共培养后，使用免疫荧光法检测Caco-2细胞β-catenin入核情况，使用Western blot法检测ZO-1、E-Cadherin等紧密连接蛋白表达情况。采用DSS（葡聚糖硫酸钠）对C57小鼠进行类IBD肠炎造模，实验组使用Salinomycin（5 mg/kg，腹腔注射），对照组为对应溶剂生理盐水，分别对小鼠进行处理，评价该抑制剂对肠炎的治疗作用。结果 与对照组相比，过表达WNT2b基因可致成纤维细胞分泌WNT2b蛋白显著增加，并促进Caco-2细胞β-catenin入核（P＜0.01），紧密连接蛋白表达下降；Caco-2细胞中敲低FZD4表达可逆转这一作用。Salinomycin可明显减轻对DSS小鼠肠道炎症并使肠黏膜紧密连接蛋白表达增多。结论 WNT2b高表达成纤维细胞破坏肠黏膜屏障功能，是治疗IBD的潜在靶点。
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