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目的构建MK—EGFP真核表达质粒,研究该融合蛋白在肝癌细胞株Hep—G2中的定位。方法RT—PCR技术扩增MK编码基因,克隆到真核表达载体pEGFP—N2中,重组质粒pMK—EGFP转染肝癌细胞Hep—c2,显微镜下实时追踪观察融合蛋白的胞内表达与定位。结果成功构建表达质粒pMK—EGFP,真核转染后,在宿主细胞内发生核定位,融合蛋白在核仁区富集。结论转染产生的MK—EGFP融合蛋白在人肝癌细胞Hep—G2中大量表达,并发生明显的核定位现象。