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目的
研究鼠胚胎颌面组织中外胚间充质干细胞(ectomesenchymal stem cells, EMSC)的生物学特性,探讨p75+EMSC的体外分化及影响因素,为揭示牙齿发生、发育机制提供实验依据。
方法通过提取12.5 d SD鼠胚胎颌面组织,用免疫荧光染色方法显示EMSC的迁移位置;用p75神经营养因子受体标记EMSC,通过流式细胞技术分选出p75+EMSC,并检测细胞周期和干细胞相关细胞表面抗原。
结果免疫荧光染色结果说明颅神经嵴源性干细胞在鼠胚胎12.5 d迁移到颌突中。p75+ EMSC的阳性分选率为6.1%,细胞呈均匀成纤维细胞形态,生长曲线呈"S"型,在传代过程中S期的比例稳定。细胞特异性标志物CD29、CD146、Stro-1标记p75+EMSC,其在p75+EMSC中的表达均较高(>90%)。
结论SD鼠受孕12.5 d时,胚胎的牙齿启动尚未发生;分选后的p75+EMSC在传代过程中具有稳定的增殖能力和干细胞特征,尚未开始分化。