【摘 要】
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研究了不同胎龄、消化液、培养液对转绿色荧光蛋白(GFP)基因小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)分离和培养的影响,并对其生长形态进行观察结果表明,在实验室条件下.12.5~14.5d胎龄的GFP-MEF分离效
【机 构】
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西北农林科技大学动物科技学院,湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/湖北省动物胚胎工程及分子育种重点实验室,西北农林科技大学动物医学院
【基金项目】
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国家自然基金(99190503):国家新品种培育专项(2008ZX08006-003).
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研究了不同胎龄、消化液、培养液对转绿色荧光蛋白(GFP)基因小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)分离和培养的影响,并对其生长形态进行观察结果表明,在实验室条件下.12.5~14.5d胎龄的GFP-MEF分离效果最好,0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA所用时间短,消化后培养细胞贴壁率高:GFP-MEF形态以小梭形为主,呈漩涡状、鱼群状生长;最佳培养液为DMEM添加10%胎牛血清。研究获得了实验室分离制备GFP—MEF的方法,为制作饲养层和进一步构建转基因动物奠定基础。
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