【摘 要】
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目的研究牛樟芝总三萜(ACTT)提取工艺及其抗肿瘤活性。方法采用星点设计-效应面法(CCD-RSM)优化ACTT的提取工艺;通过MTT法检测其对人肝癌HepG2细胞体外增殖抑制作用;以最佳质
【机 构】
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广州中医药大学,东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院,广东省中药新药研发重点实验室,中山大学新华学院,
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目的研究牛樟芝总三萜(ACTT)提取工艺及其抗肿瘤活性。方法采用星点设计-效应面法(CCD-RSM)优化ACTT的提取工艺;通过MTT法检测其对人肝癌HepG2细胞体外增殖抑制作用;以最佳质量浓度的ACTT提取物(ACTTE)处理HepG2细胞,应用荧光显微镜进行形态学观察;应用Annexin V凋亡检测试剂盒进行流式细胞分析,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果优化的工艺为加20倍量的90%乙醇,超声提取2次,每次40 min,超声功率400 W,ACTT提取率达11.87%,实际值与预测值的偏差为1.56%;不同质量浓度(12.5~200μg/m L)的ACTTE对HepG2细胞的增殖均有明显的抑制作用(P<0.01);直接形态显微观察及Hoechst33342荧光染色可观察到核浓缩及核碎裂等典型细胞凋亡特征及凋亡小体;流式细胞仪结果显示,给药组细胞凋亡率与空白组相比,有显著差异(P<0.01)。结论 CCD-RSM优化牛樟芝的超声醇提工艺,实际值与预测值吻合度高,预测性良好,是可行的;ACTTE体外对HepG2细胞有明显的增殖抑制及诱导凋亡的作用。
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