用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素的方法研究

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chj0821031
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目的探索用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素(endostatin)重组蛋白的最佳生产工艺路线。方法用pThioHis-endo重组质粒转化不同的大肠杆菌BL21、JM109、DH5α,经几种不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷(isopropyhhio-galactoside,IPTG)诱导表达重组融合蛋白,或诱导表达不同时间后,采用SDS-PAGE分析表达产物;按所优化的条件进行重组内皮抑素的表达、包涵体的提取、洗涤、变性和复性,最后经Ni^+柱纯化,再通过SDS-PAGE分析纯化的结果。结果3种大肠杆菌
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