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以脱脂后的鮰鱼肉为原料，采用分步酶解法制备血管紧张素转化酶（ACE）抑制肽，通过正交试验优化酶解条件。最佳酶解工艺：调节pH为8,温度为37℃,底物浓度为0.17 g/mL,先加胰蛋白酶，酶活/底物量为6 U/mg,水解1 h后再调节pH为9,温度为55℃,再加入碱性蛋白酶，酶活/底物量为6 U/mg,水解4 h。在此条件下，鮰鱼肉蛋白水解度为12.63%,酶解液ACE抑制率为18.7%。分子量分布分析发现酶解产物分子量主要分布在500 Da以下，占多肽的98.23%。酶解产物经超滤（3 000 Da）分离后ACE抑制率提高至35.4%,再用DA201-C大孔吸附树脂脱盐后ACE抑制率为56.6%,最后用葡聚糖凝胶G-15柱层析进行纯化后得到3个组分，组分G2的ACE抑制率为66.9%。经过分离纯化后的ACE抑制肽活性相比原酶解液提高了3.6倍。