【摘 要】
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目的建立人羊膜上皮细胞分离、培养及鉴定方法。方法从足月分娩人胎盘剥离羊膜,采用胰蛋白酶消化法分离人羊膜上皮细胞(hAECs),采用免疫细胞化学、免疫荧光染色及流式细胞术
【机 构】
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遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室
【基金项目】
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贵州省科技计划发展项目(2051;2003JGY005)
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目的建立人羊膜上皮细胞分离、培养及鉴定方法。方法从足月分娩人胎盘剥离羊膜,采用胰蛋白酶消化法分离人羊膜上皮细胞(hAECs),采用免疫细胞化学、免疫荧光染色及流式细胞术分析其表型特征,使用含表皮生长因子LG-DMEM培养基培养。结果采用低速旋转胰蛋白酶消化法从羊膜分离的hAECs数为(6.13±1.42)×107/份(n=12),所分离的hAECs明显表达上皮细胞标志物角蛋白CK19,不表达间充质细胞标志物波形蛋白,不同程度地表达CD29、CD44和CD71。在表皮生长因子存在的条件下,hAECs生长增殖较快,培养至第6天细胞总数可增殖171倍。结论建立了人羊膜上皮细胞分离、培养及鉴定方法,hAECs具有上皮细胞的特异标志和间充质干细胞的某些表型特征。
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