【摘 要】
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采用CTAB改良法,从苜蓿成熟叶片中提取到高质量、高纯度的DNA。对RAPD反应程序的重要参数进行摸索和优化试验,建立的适合苜蓿RAPD分析应用的体系组成为:反应液总体积25μL,模
【机 构】
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延边大学农学院,延边大学农学院,吉林吉农草业科技发展有限公司 吉林龙井133400,吉林龙井133400,吉林公主岭136100
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采用CTAB改良法,从苜蓿成熟叶片中提取到高质量、高纯度的DNA。对RAPD反应程序的重要参数进行摸索和优化试验,建立的适合苜蓿RAPD分析应用的体系组成为:反应液总体积25μL,模板DNA浓度135 ng.μL-1,10×缓冲液浓度2.5 mmol.L-1,10碱基引物浓度15pmol,Taq DNA聚合酶1U,dNTP浓度1.5mmol.L-1,Mg2+浓度2.5 mmol.L-1。
CTAB improved method was used to extract high quality and high purity DNA from mature leaves of alfalfa. The key parameters of the RAPD reaction program were explored and optimized. The system for the RAPD analysis of alfalfa was established. The total volume of the reaction solution was 25 μL, the template DNA concentration was 135 ng.μL-1, the concentration of the 10 × buffer solution was 2.5 mmol.L -1, 10 primer concentration 15 pmol, Taq DNA polymerase 1U, dNTP concentration 1.5mmol.L-1, Mg2 + concentration 2.5 mmol.L-1.
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