草木樨状黄芪变异系中甲硫氨酸代谢相关cDNA的分子克隆及其在大肠杆菌中的表达

来源 :西北植物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wangzhenyu86

【摘要】

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利用mRNA差异显示技术(differential display)从草木樨状黄芪耐甲硫氨酸变异系中分离到一差异cDNA片段，命名为tm03(360bp)。mRNA杂交结果显示，该片段只在变异苗中表达，初步确定

【作者】

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刘永军景建洲贾敬芬李振勇

【机构】

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西北大学生命科学学院陕西省生物技术重点实验室,清华大学生物技术系,华美生物工程公司博士后工作站

【出处】

：

西北植物学报

【发表日期】

：

2004年1期

【关键词】

：

草木樨状黄芪变异系甲硫氨酸代谢克隆表达 Astragalus melilotoides Pall. variant linemethionine-meta

【基金项目】

：

陕西省教育厅重点科研项目 02JS06

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利用mRNA差异显示技术(differential display)从草木樨状黄芪耐甲硫氨酸变异系中分离到一差异cDNA片段，命名为tm03(360bp)。mRNA杂交结果显示，该片段只在变异苗中表达，初步确定其与甲硫氨酸代谢相关。测序后在Genebank搜寻，未发现有同源序列。进一步分析表明，该cDNA克隆可编码完整的蛋白。在该基因片段两端分别合成含HindⅡ和BamH Ⅰ酶切位点的引物，用PCR扩增后亚克隆到pRSET A表达载体，转化宿主菌JMl09(DE3)，经IPTG诱导表达了N′端含6个组氨酸

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