【摘 要】
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采用semi-qRT-PCR、细胞转染、Hoechst33342和吖啶橙(AO)荧光染色、流式细胞术等方法,检测体外培养的猪前体脂肪细胞经维甲酸X受体α(RXRα)的配体9顺式维甲酸(9-cis Retinoi
【机 构】
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西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室,西南民族大学生命科学与技术学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.30471239)资助
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采用semi-qRT-PCR、细胞转染、Hoechst33342和吖啶橙(AO)荧光染色、流式细胞术等方法,检测体外培养的猪前体脂肪细胞经维甲酸X受体α(RXRα)的配体9顺式维甲酸(9-cis Retinoicacid,9-cisRA)处理、转染增强型绿色荧光蛋白(pEn-hanced green fluorescent proteinsC2)-RXRα(pEGFPC2-RXRα)重组质粒和化学合成的RXRα-小分子干扰RNA(small interfering RNA)(RXRα-siRNA)后细胞凋亡的变化。结果表明,猪前体脂肪细胞发生凋亡的形态学变化为细胞首先体积缩小,细胞浆凝缩,染色质逐渐凝集,细胞核固缩呈均一的致密物,进而断裂,胞膜仍完整,然后胞膜不断出芽、脱落,最后细胞变成数个大小不等的由膜包裹的凋亡小体;10nmol/L9-cisRA组与对照组相比,凋亡率显著降低(P<0.05);10μmol/L9-cisRA组凋亡率则显著高于对照组(P<0.05);转染pEGFPC2-RXRα和RXRα-siRNA后猪前体脂肪细胞RXRαmRNA表达水平显著上调和下调(P<0.05),且pEGFPC2-RXRα组凋亡率显著低于对照组(P<0.05),RXRα-siRNA组凋亡率显著高于对照组(P<0.05)。RXRα具有抑制猪前体脂肪细胞凋亡的作用。
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