【摘 要】
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目的 基于对骨癌痛大鼠脊髓星形胶质细胞TAK1/JNK/c-Jun信号通路的调控,探讨华蟾素缓解骨癌痛的作用机制.方法 选取雌性SD大鼠,随机分成6组,在造模前后检测行为学指标,最后一
【机 构】
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黄冈市中医医院,湖北黄冈438000;三峡大学附属第二人民医院(宜昌市第二人民医院),湖北宜昌443002;三峡大学医学院,国家中医药管理局中药药理(肿瘤)科研三级实验室,湖北宜昌443000;襄阳市
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目的 基于对骨癌痛大鼠脊髓星形胶质细胞TAK1/JNK/c-Jun信号通路的调控,探讨华蟾素缓解骨癌痛的作用机制.方法 选取雌性SD大鼠,随机分成6组,在造模前后检测行为学指标,最后一次行为学检测结束后处理大鼠,Western blot法检测相关蛋白的表达情况,免疫荧光双标检测脊髓 c-jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinases,JNK)蛋白与胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的共定位情况,ELISA法检测脊髓相关细胞因子的含量.结果 与模型组相比,华蟾素组大鼠的痛阈值上升(P＜0.01或P＜0.05);鞘内插管组大鼠的痛阈值未见明显变化;抑制剂组进行鞘内给药后,大鼠的痛阈值明显升高(P＜0.05).Western blot结果显示,模型组大鼠脊髓中GFAP、p-TAK1、p-JNK、p-c-Jun蛋白的表达增多(P＜0.01);华蟾素能显著降低模型组大鼠脊髓中GFAP、p-TAK1、p-JNK、p-c-Jun蛋白的表达(P＜0.01或P＜0.05);抑制剂组大鼠脊髓中p-JNK、p-c-Jun蛋白的表达降低(P＜0.05),而GFAP、p-TAK1蛋白的表达未见明显差异.免疫荧光结果显示,脊髓中p-JNK与GFAP共表达.ELISA结果显示,模型组大鼠脊髓中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、CCL2的表达较假手术组增多(P＜0.01);华蟾素组及抑制剂组脊髓中TNF-α、IL-1β、CCL2的表达较模型组减少(P＜0.01);抑制剂组CCL2的表达较华蟾素组降低(P＜0.05),而TNF-α、IL-1p的表达未见明显差异.结论 华蟾素可能是通过抑制脊髓星形胶质细胞中TAK1/JNK/c-Jun信号通路相关蛋白的活化,减少细胞因子释放,从而发挥缓解骨癌痛的作用.
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