施氏假单胞菌固氮调控蛋白NifA调节电子传递体rnf1基因簇的表达

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施氏假单胞菌A1501中电子传递体基因簇rnf1位于固氮基因岛上,该基因簇的突变造成固氮酶活显著下降。在rnf1基因簇的启动子区含有固氮调控蛋白Nif A的保守结合序列,实时定量qRT-PCR分析证实了nif A突变株中rnf1基因簇的表达量与野生型相比急剧下调,暗示着Nif A直接参与rnf1基因簇的表达调控。细菌单杂交系统的体内互作实验表明,在大肠杆菌体内Nif A与rnf1基因簇启动子存在直接相互作用;进一步的凝胶阻滞试验证明原核表达纯化的Nif A蛋白与rnf1基因簇启动子序列存在体外直接结合。上述结果从分子水平上给出了两者间相互作用的直接证据,为深入研究联合固氮基因的表达调控网络奠定了基础。
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