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目的
观察分泌型卷曲相关蛋白4(sFRP4)在常染色体显性遗传性多囊肾病(ADPKD)中的表达情况及其在ADPKD中诱发凋亡的作用。
方法(1)血清：收集12例健康人和20例ADPKD患者的血清标本，ELISA法检测血清中sFRP4的水平。(2)组织：收集肾癌根治性切除术后癌旁正常肾组织以及ADPKD患者肾组织，免疫组化法观察sFRP4在肾组织中的表达情况；实时定量PCR法检测肾组织中sFRP4 mRNA及Caspase-3 mRNA水平；TUNEL法检测肾组织细胞凋亡。(3)细胞：HEK-293T细胞被分为3组：空白对照组、对照质粒PcDNA6转染组和Flag.sFRP4.PcDNA6质粒转染组，Western印迹法检测凋亡相关蛋白Caspase-3表达水平，流式细胞术检测各组细胞凋亡率。
结果(1)ELISA检测结果显示，ADPKD患者血清sFRP4水平显著高于健康人(P<0.05)。(2)免疫组化结果显示，sFRP4在ADPKD患者的肾小管上皮细胞胞质中表达明显增加。(3)实时定量PCR结果显示，ADPKD患者肾组织sFRP4 mRNA和Caspase-3 mRNA表达水平显著高于正常肾组织(均P<0.05)。(4)TUNEL检测结果显示，ADPKD患者肾小管上皮细胞凋亡较正常肾组织明显增加。(5)与对照组相比，过表达sFRP4的HEK-293T细胞中Caspase-3蛋白水平显著上调(P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。
结论sFRP4在ADPKD患者血液及肾组织中均明显升高，ADPKD中存在肾小管上皮细胞的异常凋亡，过表达sFRP4可以诱导HEK-293T细胞凋亡，推测sFRP4升高与ADPKD肾组织的异常凋亡增加有关。