茶树CsWRKY6、CsWRKY31和CsWRKY48基因的分离及表达分析

来源 :浙江大学学报(农业与生命科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:hasolao
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以茶树品种‘铁观音’的芽叶为供试材料,采用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)技术克隆获得3个WRKY基因CsWRKY6(GenBank登录号:MG298953)、CsWRKY31(MG298958)和CsWRKY48(MG298961)。它们的开放阅读框长度分别为1 734、1 299和960 bp,分别编码577、432和319个氨基酸。系统发育树及蛋白结构域分析表明,3个茶树WRKY基因均属于第Ⅱ类WRKY蛋白,都含有高度保守的DNA结合域(WRKYGQK)和锌指结构组成的WRKY结构域,其中Ⅱb亚类的CsWRKY6和CsWRKY31锌指结构模式为C-X5-C-X23-H-X-H,Ⅱc亚类的CsWRKY48锌指结构模式为C-X4-C-X23-H-X-H。3个基因在茶树不同组织中均有表达且具有明显的组织特异性,CsWRKY6在老叶中的表达量显著高于其他组织,CsWRKY31在花中的表达量最高,CsWRKY48在根和茎中的表达量显著高于叶、茶花和茶果。蛋白互作预测表明3个基因可能通过与多个基因互作来响应逆境胁迫,荧光定量表达分析显示低温处理能显著上调茶树叶片中3个基因的表达;在干旱处理下CsWRKY31和CsWRKY48表达均显著上调且在12 h后达到最大,外源脱落酸处理后CsWRKY48表达迅速上调,而CsWRKY6和CsWRKY31表达下调。推测这3个基因与茶树抗逆响应密切相关。
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