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目的：构建LIM激酶（Limk）1不同突变体的HA融合表达载体,并在真核细胞中表达,观察这些突变体在细胞内定位.方法：利用聚合酶链式反应（PCR）扩增Limk1全长序列,构建HA-Limk1真核表达质粒;利用定点突变策略对HA-Limk1进行核定位信号（NLS）缺失突变,命名为Limk1-NLS（del）;用合成两条互补序列退火获得目标片段插入载体的策略构建Limk1-NLS;将2表达质粒转染HepG2细胞,细胞免疫荧光方法以及核质分离后用western-blot检测其在细胞中定位.结果：经测序鉴定Lim