【摘 要】
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目的:探讨细胞外信号调节激酶(ERK1/2)通路、多药耐药基因(mdr-1)、核糖核苷还原酶M1(RRM1),在胰腺癌细胞株SW1990吉西他滨(GEM)化疗耐药中的相互关系及作用.方法:通过浓度梯
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目的:探讨细胞外信号调节激酶(ERK1/2)通路、多药耐药基因(mdr-1)、核糖核苷还原酶M1(RRM1),在胰腺癌细胞株SW1990吉西他滨(GEM)化疗耐药中的相互关系及作用.方法:通过浓度梯度递增法,诱导建立耐各种浓度GEM的胰腺癌细胞株.应用免疫组化图像分析方法,半定量检测各耐药细胞株中ERK1/2蛋白的表达;RT-PCR的方法检测mdr-1、RRMl mRNA表达,条带图使用Band凝胶分析软件进行半定量分析;MTT法测定0D492光密度值.计算IC50值.结果:建立的耐药细胞株可以在GEM终浓度分别为0、30、60、100、150、200nmol/L的培养液中稳定生长并传代.ERK1/2、mdr-1、RRMl的表达均随着耐GEM浓度的增加而升高,细胞耐GEM的浓度分别与mdr-1、RRM1基因表达呈现出高度正相关(r=0.960,P=0.002和r=0.966,P=0.002);ERK1/2灰度值也与mdr-1、RRM1基因的表达存在相关性(r=0.943,P=0.005和r=-0.883,P=0.02).耐GEM 200nmol/L的细胞株,ERK1/2灰度值、mdr-1/β-actin、RRM1/β-actin分别为164.22±13.17、1.41±0.04、1.45±0.18;经阻断剂U0126作用后三者的表达均呈现同步降低,分别为186.85±13.14、0.23±0.02、0.21±0.03;而激活剂EGF作用后,其表达呈现升高趋势,分别为106.55±16.45、1.50±0.07、1.52±0.12.耐GEM Onmol/L和200nmol/L浓度的细胞株,其IC50值分别为4.104和10.20,经阻断剂U0126处理后.IC50值下降到3.26和4.50;而经EGF处理后,IC50值则分别上升到8.89和17.17.结论:ERK通路可能参与调控mdr-1、RRM1基因表达,从而介导胰腺癌细胞株SWl990吉西他滨化疗抵抗.
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