【摘 要】
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目的 探讨多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)在胶质瘤细胞系U251细胞中的作用及引起的相关基因变化.方法 以PEGFP-LRIG1质粒转染体外常规培养的U251细胞,同时设PEGFP-N
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目的 探讨多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)在胶质瘤细胞系U251细胞中的作用及引起的相关基因变化.方法 以PEGFP-LRIG1质粒转染体外常规培养的U251细胞,同时设PEGFP-N1组和空白组作为对照,RT-PCR检测3组细胞LRIG1、GDNF、拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)基因表达的变化.Western blotting检测细胞LRIG1蛋白的表达；绘制PEGFP-N1和PEGFP-LRIG1组细胞1～5 d的生长曲线并计算替莫唑胺对2组细胞的抑制率.应用siGDNF和siLRIG1敲低U251细胞中GDNF和LRIGI的表达,同时设单纯siGDNF、siLRIG1组和空白组作为对照,比较细胞增殖率的变化.结果 3组细胞LRIG1基因和蛋白、TOPOⅡ和GDNF基因表达不同,差异有统计学意义(P＜0.05)；与PEGFP-N1组和空白组比较,PEGFP-LRIG1组细胞LRIG1基因和蛋白的表达较高,TOPOⅡ和GDNF基因表达较低,差异均有统计学意义(P＜0.05).细胞生长1～5 d时,PEGFP-LRIG1组细胞计数低于PEGFP-N1组,差异有统计学意义(P＜0.05).加入替莫唑胺培养后,PEGFP-LRIG1组细胞抑制率高于PEGFP-N1组,差异有统计学意义(P＜0.05).Westernblotting结果显示应用siGDNF和siLRIG1敲低LRIG1和GDNF成功.siLRIG1组细胞抑制率高于对照组,siLRIG1 +siGDNF组胞抑制率低于siLRIG1组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 LRIG1可以通过调节GDNF的表达来调节U251细胞的生长；LRIG1可以抑制GDNF、TOPOⅡ的表达,提高胶质瘤细胞对替莫唑胺的化疗敏感性.
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