【摘 要】
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目的建立蜜蜂黑蜂王台病毒(Black queen cell virus,BQCV)的RT-PCR快速检测方法。方法根据BQCV全基因组序列,在其3′端1 000 bp的区域内设计1对特异性PCR引物,从受BQCV感染的
【机 构】
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吉林农业大学发展学院; 吉林省产品质量监督检验院; 江苏出入境检验检疫局; 吉林出入境检验检疫局;
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目的建立蜜蜂黑蜂王台病毒(Black queen cell virus,BQCV)的RT-PCR快速检测方法。方法根据BQCV全基因组序列,在其3′端1 000 bp的区域内设计1对特异性PCR引物,从受BQCV感染的蜜蜂的蛹样品中提取总RNA,进行RT-PCR,并对该法的特异性、敏感性及重复性进行验证。结果从BQCV全基因组序列中可扩增出700 bp的基因条带。该方法可扩增0.1 ng的BQCV DNA;仅能在BQCV中扩增出700 bp的目的基因条带,在蜜蜂急性麻痹病病毒、残翼病病毒、蜜蜂囊状幼虫病病毒中均未扩增出目的基因条带;对相同样品进行多次检测,均在700 bp处出现目的条带。结论已成功建立BQCV RT-PCR快速检测方法,该方法特异性强,敏感性高,重复性好,可用于黑蜂王台病的快速诊断和混合感染的鉴别诊断。
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