【摘 要】
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目的 以 3个遗传病为例 ,探讨长链 RT- PCR在基因突变分析中的应用。 方法 采用长链 RT- PCR扩增 AL D、ATP7B和 FV的 m RNA编码区。从凝胶中回收预期扩增产物 ,再以分段
【机 构】
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南京军区福州总医院,南京军区福州总医院,三明市第一人民医院
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目的 以 3个遗传病为例 ,探讨长链 RT- PCR在基因突变分析中的应用。 方法 采用长链 RT- PCR扩增 AL D、ATP7B和 FV的 m RNA编码区。从凝胶中回收预期扩增产物 ,再以分段或全长方式进行二次 PCR。对二次 PCR产物进行直接序列测定 ,查找序列突变。 结果 在长链 RT- PCR中 ,三种 m RNA的编码区全长均得到扩增 ,预期扩增产物分别为 2 4 4 0 ,4 4 80 ,6 789bp。在二次 PCR中 ,分段扩增策略和全长扩增策略均可获得大量的特异性产物 ,后者均可直接用于序列测定。 结论 长链 RT- PCR对于长链 m RNA的序列分析是一个简便可靠的方法。
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