用5-Fu治疗MT/p210bcr-abl转基因小鼠的研究

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以5-氟脲嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)腹腔注射治疗了12只携有金属硫蛋白(Metalothionein,MT)启动子和增强子序列、bcr-ablcDNA(p210)序列及SV40剪切和Poly(A)信号序列的转基因慢粒白血病(chronicmyeloidleukemi-a,CML)MT/p210bcr-abl小鼠,于治疗的第5d及第10d从不同脏器提取总RNA、DNA及蛋白质,分别进行PCR分析、RT-PCR检测被转移基因的表达水平及免疫沉淀法分析p210bcr-abl转基因产物的激酶活性.结果表明,被转移基因在脾脏和骨髓中表达水平较高,胸腺和肾脏中呈低水平表达.5-Fu活体治疗10d后,被转移基因的表达水平及其表达产物的激酶活性均被明显抑制 Twelve metallothionein (MT) promoter and enhancer sequences, bcr-ablcDNA (p210) sequence, and SV40 cleavage were treated with 5-fluorouracil (5-Fu) intraperitoneally. Poly(A) signal sequence in transgenic chronic myeloid leukemi-a (CML) MT/p210bcr-abl mice. Total RNA, DNA, and protein were extracted from different organs on the 5th and 10th day of treatment. PCR analysis was performed. , RT-PCR detection of the expression level of the transferred gene and immunoprecipitation analysis of p210bcr-abl transgene product kinase activity. The results showed that the transgene was expressed in the spleen and bone marrow, and expressed in the thymus and kidney. After 10 days of treatment with 5-Fu in vivo, the expression level of the transferred gene and the kinase activity of the expressed product were significantly inhibited
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