枸杞多糖对H2O2诱导的视网膜神经节细胞凋亡的影响

来源 :宁夏医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ss22ss33
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目的探讨枸杞多糖(LBP)对氧化应激损伤的视网膜神经节细胞的保护作用。方法体外培养大鼠视网膜神经节细胞株RGC-5,实验分为正常对照组、LBP组、H2O2组、LBP+H2O2组。正常对照组:DMEM完全培养基常规培养;LBP组:用含10%FBS和浓度为40mg·L-1 LBP的DMEM培养基培养;H2O2组:含体积分数10%FBS的DMEM高糖培养基培养,同时加入200μmohL-1 H2O2溶液;LBP+H2O2组:用含10%FBS和200μmol·L-1 H2O2的DMEM培养基培养,同时加入浓度为40mg·L-1 LBP进行干预。使用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法和AnnexinV-FITC法检测细胞存活率及凋亡率。分别应用RT-PCR和Western blot法观察Bcl-2和Bax等因子的动态变化。结果MTT结果显示,H2O2组细胞存活率较正常对照组降低,LBP+H2O2组细胞存活率较H2O2组提高(P<0.05)。AnnexinV-FTTC检测结果显示,正常对照组、LBP组、H2O2组、LBP+H2O2组细胞凋亡率分别为4.90%,4.25%,32.35%,24.21%;与H2O2组相比,LBP+H2O2组细胞凋亡率降低(P<0.05)。RT-PCR以及Western blot结果显示,正常对照组与LBP组Bcl-2及Bax表达量差异无统计学意义(P>0.05);H2O2组与正常对照组相比Bcl-2表达量降低,Bax表达量升高(P<0.05);LBP+H2O2组与H2O2组相比Bcl-2表达量升高,而Bax表达量降低(P<0.05)。结论 LBP通过抑制细胞凋亡,对氧化应激损伤的视网膜神经节细胞发挥保护作用。
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