【摘 要】
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分离猪(杜长大三元杂)外周血单核细胞(PBMC)进行体外培养,经诱导剂LPS或ConA的诱导培养48 h后,提取细胞总RNA,应用RT-PCR扩增猪IL-基因,并克隆到pMD18-T载体后测序.结果成功
【机 构】
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华南农业大学,兽医学院禽病室,广东,广州,510642;
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分离猪(杜长大三元杂)外周血单核细胞(PBMC)进行体外培养,经诱导剂LPS或ConA的诱导培养48 h后,提取细胞总RNA,应用RT-PCR扩增猪IL-基因,并克隆到pMD18-T载体后测序.结果成功获得猪IL-6基因重组质粒pMDpIL-6,序列分析发现所获得的猪IL-6cDNA长度为716 bp,开放阅读框为636 bp,编码211个氨基酸,相对分子质量约24 ku,等电点5.5.所获得的猪IL-6与GenBank上已报道的不同来源猪的IL-6有单个氨基酸存在差异;与人和其他动物IL-6氨基酸序列的同源性为78.1%～90.1%,同时反映出IL-6基因具有种的多样性,不同种动物的IL-6基因亲缘关系越近,进化关系也越近.
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