tTS真核表达载体构建及稳定转染HepG2细胞系的建立

来源 :山西农业大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：nhhwhm

【摘要】

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为了构建tTS真核表达载体,转染HepG2细胞,建立稳定转染的HepG2细胞系,采用PCR方法,以质粒pTet-tTS为模板扩增tTS基因的编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载

【作者】

：

帅丽芳赵勇张若霜银涛唐博恒

【机构】

：

广州军区疾病预防控制中心,中山大学实验动物中心

【出处】

：

山西农业大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2010年4期

【关键词】

：

TTS 基因表达真核表达载体 HEPG2细胞系 tTS Gene expression Eukaryotic expression vector Hep

【基金项目】

：

广东省科技计划项目（2007A060305013）

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为了构建tTS真核表达载体,转染HepG2细胞,建立稳定转染的HepG2细胞系,采用PCR方法,以质粒pTet-tTS为模板扩增tTS基因的编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pApoE-rtTA-Neo,经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染HepG2细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的HepG2细胞系,用RT-PCR、Western blot法检年测tTS的表达,成功构建了pApoE-rtTA-tTS-Neo真核表达载体,并建立了稳定转染的HepG2细胞系,成功地表达目的基因。真

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