BrdU标记山羊皮肤组织的免疫组化检测

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目的:探讨5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)标记绒山羊皮肤组织的可行性及免疫组化检测条件的优化。方法:通过对绒山羊颈部静脉注射不同剂量BrdU,活体取背部皮样,经4%多聚甲醛固定,石蜡包埋切片,免疫组织化学技术检测不同的BrdU注射剂量、二抗及链霉菌抗生物素-过氧化物酶浓度、抗原修复方式、DNA变性温度对BrdU标记结果的影响,以寻求检测的最佳条件。结果:观察到在试验组山羊皮肤组织中有红色的BrdU阳性细胞的分布。未经BrdU标记的对照组动物的同部位组织中均未见BrdU阳性细胞出现,而显示阳性结果的连续切片的阴性对照均为阴性。结论:BrdU可以用于内蒙古绒山羊的活体标记,BrdU标记剂量无明显区别;2 mol/L HCl 37℃变性30分钟,胰蛋白酶37℃修复30分钟,生物素标记的第二抗体和链霉菌抗生物素-过氧化物酶的稀释度为1∶100,此种条件下免疫组化检测结果最佳。
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