静态压力对大鼠视网膜微血管内皮细胞内皮素-1和NO表达的影响

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目的 观察静态压力变化对大鼠视网膜微血管内皮细胞(RMECs)形态、增生活性及分泌血管活性物质内皮素-1(ET-1)和一氧化氮合酶(NOS)的影响.方法 体外培养并鉴定大鼠RMECs,分为A(1.33kPa)、B(2.67kPa)、C(5.33kPa)和D(10.67kPa)组和未加压对照组.用倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,常规方法 进行细胞计数,锥虫蓝染色检测活细胞比例.用Griess硝酸还原酶法检测NO代谢产物NO_2~-/NO_3~-的含量,放射免疫法检测培养细胞的ET-1蛋白表达;用RT-PCR法半定量研究RMECs中ET-1、eNOS、iNOS mRNA的表达.结果 B、C、D组RMECs细胞核膨大,胞体拉长,可见少量悬浮细胞;静态压力促进RMECs增生(F=12.205,P<0.01),C组和D组细胞数量高于对照组、A组和B组(P<0.01);静态压力升高造成各组细胞损伤,拒染率降低(F=11.180,P<0.01),B、C、D组细胞拒染率低于对照组(P<0.05).B、C、D组ET-1浓度较对照组增加(P<0.01).C组和D组RMECs培养液中NO_2~-/NO_3~-浓度高于对照组(P<0.01).B、C、D组RMECs中ET-1 mRNA表达较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01);C组和D组RMECs中eNOS mRNA和iNOS mRNA表达较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 高静态压力可直接导致RMECs的结构损伤,高静态压力下RMECs合成ET-1、NO增多可能是高眼压眼底病变的机制之一。

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