重组pQE30 tPAr质粒在JM109菌株中的稳定性研究

来源 :武汉大学学报(理学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:xcn1980
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将构建好的含有人变异tPA基因的重组pQE30 tPAr质粒的JM109菌株原始种子库菌种,在含Amp的平板培养基划线法连续传代至100代,其在固体培养基中生长速度、菌落形态和菌体形态、Amp抗性等方面与原始种子库无明显差异;每隔10代提取质粒DNA用HindⅢ和KpnⅠ限制性内切酶切割检查,酶切图谱没有改变;DNA测序未见tPAr基因变异.用原代和第100代培养诱导表达tPAr,表达水平和tPAr活性均无明显差异.菌体的SDS-pAGE图谱也完全相同.以上结果表明所建立的JM109tPAr工程菌株具有良
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